黄曲霉B1检测卡 操作说明

黄曲霉毒suB1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是目前已知的化学物质中致癌性zui强的一种。黄曲霉毒suB1对人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。国家质检总局规定黄曲霉B1是大部分食品的必检项目之一。本品的检测灵敏度为5ng/ml。

【测定原理】

本品采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合AFB1-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB1的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1单克隆抗体。

【样品制备】

使用仪器：①感量0.1g的天平 ②玻璃器皿：蒸发皿或烧杯、量筒、滴管、移液管 ③小型粉碎机、④ 4000rpm离心机等。

1. 谷物：任取5g以上有代表性样品并粉碎过20目筛，准确称取2.0g均匀粉碎试样于配套离心管中，再准确加入4ml纯净水和4.0ml乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，4000rpm离心1min得上清液，将上清液用吸管移出2.0ml到蒸发皿或小玻璃杯中，用电吹风吹干上清液，再根据样品的种类用以下规定的稀释液量用铝箔袋内配套吸管反复冲洗，*溶解杯底所有的固体，此溶解液为样品提取液即检测液。考虑不同样品对黄曲霉毒suB1的高含量要求，请参考下表进行用稀释液溶解杯底固体：

2. 饲料（以残留*50ppb计算）：任取5g以上有代表性样品并粉碎过20目筛，准确称取2.0g均匀粉碎试样于配套离心管中，再准确加入4ml纯净水和4.0ml乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，4000rpm离心1min得上清液，将上清液用吸管移出0.5ml到蒸发皿或小玻璃杯中，用电吹风吹干上清液，再用2ml的稀释液量用铝箔袋内配套吸管反复冲洗，*溶解杯底所有的固体，此溶解液为样品提取液即检测液。如果残留*是30ppb，则用1.2ml的稀释液溶解；如果残留*是40ppb，则用1.6ml的稀释液溶解。

3. 食用油：称2.0g油样于小烧杯中，用8ml正乙烷分次将试样转移至分液漏斗中，准确加入4ml纯净水充分振荡3min，吸去上层正乙烷层，再加入4ml的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，静置或3000rpm离心得上清液，将上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中，用电吹风吹干，再用稀释液溶解后为样品提取液。

4. 酱油、醋、发酵酒：称取25.0g样品于小烧杯中，用5ml蒸馏水将试样转移到分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3min，静置分层。放出下层三氯甲烷层，经盛有约5g预先用三氯甲烷湿润的无水Na2SO4过滤器于蒸发皿中，后用少量三氯甲烷洗涤过滤器，洗液并于蒸发皿中，用电吹风吹干。吹干冷却后，准确加入稀释液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

【操作步骤】

1. 在进行检测前先完整阅读使用说明书，使用前将试纸卡和待检样本溶解恢复至室温。

2. 从原包装袋中取出试纸卡，打开后平放在桌面上，请在1小时内尽快使用。

3. 用吸管吸取待检样品溶液，滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时。

4. 结果应在5min左右读取，超过10min的时间判读无

【结果判定】

1.阳性：位置C显示出红色线条，而位置 T不显色时为阳性。阳性结果表明：AFB1含量超过样品允许量。

2.阴性：位置C显示出红色线条，位置 T同时显示出红色线条，且T线颜色接近C线或者深于C线时，判为阴性。阴性结果表明：AFB1含量低于样品允许量。

3.无效：位置C不显示出红色线条而位置 T显示出红色线条或位置C和位置 T均无线，该试纸卡视为无效。建议使用新的试纸卡按本说明书要求重新测试。

【特别说明】

1.请按照操作步骤进行测试，操作时请勿触摸试纸显示区。

2.如购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请到购买处进行更换。

3.本品应保存在干燥阴凉处（4--30℃），有效期12个月，生产日期见包装。

4.本品为一次性产品，请勿重复使用。

5.如遇稀释液不足，请用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。

6.本品为筛选试剂，任何阳性结果请用其他方法做进一步确认。

7.有条件的实验室可以用AFB1标准品测试后作为判断参考。